Bij laesies aan de poten bij voorkeur een monster afnemen aan de dorsale zijde van de digitale ruimte (als er laesies zijn) want besmetting van de palmaire zijde vanaf de grond maakt de interpretatie moeilijk
Het plakband niet in het fixeermiddel onderdompelen
Niet te dikke monsters afnemen
Als het monster dik is, verleng dan de aankleurtijd
Als de kleur te bleek is, opnieuw beginnen
Zet de condensor in een hoge stand en open het diafragma
Het aflezen altijd beginnen met een kleine vergroting (2x-4x)
Onderzoek het hele objectglaasje altijd in dezelfde afleesrichting (bijvoorbeeld van links naar rechts en van boven naar beneden)
Verwissel de kleurbaden van de objectglaasjes regelmatig
Reinig de microscoop iedere dag en bescherm hem tegen stof (met een hoes)
Verwijder met een gaasje resten van immersie-olie (normaal gesproken op de lens X40)
Gebruik nooit ether om de microscoop te reinigen
Materiaal
Microscoop
Kleurstoffen: RAL555, Diff Quick
Objectglaasjes
Dekglaasjes
Immersie-olie
Plakband (Scotch)
Scalpelmesjes
Naalden
Spuiten
Wattenstaafjes
Monsterafnametechniek voor:
Direct drukpreparaat
Bij pustulae, collarette, oppervlakkige wondjes, ulcera, onder korstjes
Knip indien nodig de haren weg
Druk het objectglaasje direct op de laesie
Reiniging met een wattenstaafje
Voor de gehoorgang, bij ontstekingsvocht ter hoogte van de plooien
Het wattenstaafje wordt voorzichtig op het objectglaasje gerold om het monster op te brengen
Plakbandtest (Scotch-test)
Voor gebieden die moeilijk te bereiken zijn voor een direct drukpreparaat (interdigitale ruimtes, oogleden, hanglippen, perianaal gebied) of voor droge laesies ongeacht de plaats
Druk het plakband meerdere keren op de laesies
NB: geen fixeermiddel tijdens de kleuring gebruiken
Huidafkrabsel
Vettige, seborroïsche laesies, lichenificatie, ulcera met dunne randen.
Schraap met een mesje nr. 10 of 20 (of met een scherpe lepel) over de huid en smeer het materiaal vervolgens als ‘boter op brood’ op het objectglaasje
Kleuring
Laten drogen aan de open lucht (behalve bij een plakbandtest)
Gebruik snelle kleurstoffen
Dompel het monster onder: 10 seconden per stap, daarna snel onder water afspoelen
Aflezen
Onderzoek van het monster onder de microscoop
Open het diafragma en draai de condensor omhoog om de lichtsterkte te vergroten
Begin het onderzoek met een kleine vergroting (4x) om het rijkste en interessantste onderzoeksgebied op het objectglaasje te zoeken (goede kwaliteit van de kleuring, goede cellulariteit en kwalitatief goede aanbrenging op één laagdikte)
Vervolgens overgaan op grotere vergrotingen (40x of 100x) om bestanddelen zoals Malassezia, bacteriën of celpopulaties vast te kunnen stellen
Interpretatie
Normale bestanddelen op een normaal afkrabsel van de huid of de gehoorgang
Keratinocyten met of zonder kern (corneocyten)
Bacteriën of Malassezia op huid- en slijmvliesgebieden
Geen ontstekingscellen
Afwijkende bestanddelen
Neutrofielen +++: aanwezigheid van een ontsteking die al dan niet septisch kan zijn; met de aanwezigheid van gedegenereerde neutrofielen met intracellulaire bacillen/kokken kan een bacteriële infectie aangetoond worden
Veel kokken of bacillen zonder ontstekingscellen: het gaat om een bacteriële kolonisatie door likken
Bij een groot aantal Malassezia kan de diagnose dermatitis door Malassezia gesteld worden
Simonsiella: teken van veel likken over het gebied
Eosinofielen +++: vaak aangetroffen bij dermatose door parasieten (schurftmijt, demodicose), ook aan te treffen bij pustuleuze dermatose, bijv.: pemphigus, dermatofytose)